EDTA抗原修復(fù)液(50X)

產(chǎn)品簡介：

EDTA抗原修復(fù)液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。

    細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會(huì)導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點(diǎn)，導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號(hào)減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。

    本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

    通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會(huì)大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對(duì)于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時(shí)，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來看，無論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進(jìn)行抗原修復(fù)都會(huì)有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

保存條件： 2-8℃保存，一年有效。

使用說明：

使用前請(qǐng)用雙蒸水將原液(50X)稀釋50倍成(1X)，1X抗原修復(fù)液為工作液

1.  對(duì)于石蠟切片：

a.  脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟5分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘，兩次。90%乙醇5分鐘，兩次，70%乙醇5分鐘，一次。蒸餾水5分鐘，兩次。

b.抗原修復(fù)：將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時(shí)間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，*的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

2.  對(duì)于冰凍切片：

    用免疫染色洗滌液洗滌切片5分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時(shí)間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，*的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

3.  對(duì)于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。