SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品簡介

本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備，蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。

本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小，可進(jìn)行約50次左右。

SDS-PAGE蛋白電泳套裝現(xiàn)貨供應(yīng)

使用說明：

一，前期工作：蛋白提取及定量。

二，蛋白上樣液的制備：蛋白上樣緩沖液解凍，輕輕混勻，按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液，混勻，沸水中水浴5分鐘。

三，電泳液的配制：將一包電泳液干粉全部倒入1L－2L的燒柄中，加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液，用前再稀釋10倍。

四，取10-15支1.5ml離心管，將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支，標(biāo)記好備用。

五，凝膠制備：

1，  取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉，加入1ml蒸餾水，混勻，此配好的10%過硫酸銨溶液2－8度可保存一周，一周后請(qǐng)用新的。洗干凈電泳玻璃板，夾好。

2，  根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。

注意：

1，TEMED和10%過硫酸銨zui后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4℃有效期為一周，TEMED易揮發(fā)，使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固，如溫度過低，可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加1ml ddH2O封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。

2，配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調(diào)整，主要是調(diào)整30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%），zui后用水補(bǔ)足總體積。

六，上樣，電泳，一般是濃縮膠80V，分離膠120V恒壓，等溴酚蘭電泳到合適的位置，結(jié)束電泳，染色或者進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

 附：SDS-PAGE分離膠的濃度與*分離范圍

配制6%的PAGE分離膠

配制8%的PAGE分離膠

配制10%的PAGE分離膠

配制12%的PAGE分離膠

配制15%的PAGE分離膠

3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱上層膠、積層膠或堆積膠)
                    
                                      配制不同體積的濃縮膠

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