配制培養(yǎng)基過程中應(yīng)該注意什么問題
1、為確認工作細胞庫是否受到污染,病毒種子的工作種子批次是否受到污染,培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否受到污染,可通過細菌、真菌、支原體無菌試驗確認和消除。同時,還應(yīng)驗證無菌試驗介質(zhì)的靈敏度。
實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。
2、高壓滅菌設(shè)備和過濾滅菌設(shè)備應(yīng)進行驗證,以確保滅菌滅菌效果;高壓滅菌設(shè)備調(diào)試前后每6個月進行一次驗證,每滅菌前后(滅菌后至少一次)進行驗證。
3、有毒區(qū)域應(yīng)嚴格與無毒區(qū)隔離,并應(yīng)設(shè)置獨立的空氣凈化系統(tǒng)和培養(yǎng)箱。毒性區(qū)應(yīng)在無毒區(qū)保持相對負壓,防止病毒污染培養(yǎng)細胞(特別是細胞庫)。
4、在基本培養(yǎng)基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營養(yǎng)缺陷型不能在基本培養(yǎng)基中生長而被保留下來。
擴展資料:
配制培養(yǎng)基過程中的其它相關(guān)介紹:
培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有顯著的升高。
因此,對這個步驟,操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的最終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
參考資料來源:百度百科-培養(yǎng)基
參考資料來源:百度百科-基本培養(yǎng)基
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